很多人知道蜘蛛不属于昆虫，但很难说清它的具体分类。先看直观差异，昆虫六条腿，身体分成头、胸、腹三段，头部长一对触角。蜘蛛八条腿，身体只有头胸部和腹部两段，没有触角。仅凭这几点，就不能放进昆虫纲。只知道不是昆虫还不够，要理清它在生物分类里的位置。
生物分类层级从大到小依次是界、门、纲、目、科、属、种。蜘蛛和昆虫同属于节肢动物门，到这一层还是同类，之后分化成不同分支。昆虫归六足亚门，蜘蛛属于螯肢亚门。再往下划分，昆虫是昆虫纲，蜘蛛属于蛛形纲。简单来说，蜘蛛和昆虫的关系，类似猫和狗，同属更大的门类，但是独立分属不同纲，不存在包含关系。
蛛形纲下面一共十一个目，蜘蛛只是其中蜘蛛目。蜘蛛目包含上百个科，四万多个物种。蝎子、蜱虫、螨虫、盲蛛、鞭蝎同样属于蛛形纲，它们和蜘蛛的亲缘关系，比蜘蛛和昆虫更近。蝎子外形和蜘蛛差别很大，但同纲，都依靠书肺、气管呼吸，八条腿，身体两节。
蜘蛛和昆虫的演化分化，距今大约四亿多年。最早的蛛形纲生物出现在志留纪，比恐龙早两亿多年。昆虫纲出现时间稍晚，在泥盆纪。两者从共同的节肢动物祖先分开之后，各自演化出完全不同的身体构造。昆虫演化出六足搭配翅膀，成为地球上物种数量最多的动物类群。蛛形纲选择八条腿搭配螯肢的演化路线，物种数量更少，但在陆地各类生态系统里都占据重要地位。
有个细节容易混淆，蜘蛛的头胸部生长八条步足，还有一对螯肢和一对触肢。螯肢就是前方一对附肢，用来注射毒液、固定猎物。第二对附肢是触肢，雄蛛依靠它完成交配，雌蛛用它感知环境。昆虫依靠触角感知，蜘蛛没有触角，感知依靠腿上的刚毛和触肢。蜘蛛的腿不只是行走器官，还可以感知震动、气味、声音，身体构造逻辑和昆虫完全不同。
不少人会把盲蛛当成蜘蛛。盲蛛同样属于蛛形纲，但划分在盲蛛目，和蜘蛛目是平级。盲蛛腿细长，身体是完整圆球，不分两节，没有毒腺和丝腺，不能织网吐丝，依靠腿上感觉毛捕食。很多人误认成蜘蛛，它的演化分支反而更接近蝎子。
所以分类学上，蜘蛛不属于昆虫纲，归为节肢动物门蛛形纲蜘蛛目，这个结论没有争议。大家误以为蜘蛛是昆虫，只是日常口语里虫子这个词的范围太宽泛，蜘蛛、蜈蚣、潮虫、蚯蚓都被笼统叫做虫子。但口语里的虫子只是一个宽泛称呼，里面包含的生物，演化差距能达到数亿年。